20 mM CH3COOH-CH3COONH4 (pH 4.9) / ацетонитрил (80/20)
Скорость потока:
0.6 ml/min (3.18 mm/sec)
Температура:
40 °C
Детектор:
UV at 220 nm
0.04 AUFS
В настоящее время, из-за постоянно растущих, особенно в
фармацевтической промышленности,
требований к скорости анализов и проверки качества продукции, требуются
методы быстрой хроматографии
с временем анализа две минуты и менее (Ultra Fast LC). Чтобы увеличить скорость,
используются короткие колонки
с маленьким размером частиц, одновременно увеличивается скорость потока
и давление
Специально для метода Ultra Fast LC YMC представляет стационарную фазу YMC-UltraHT Pro C18
с размером частиц 2 μm, которая идеально подходит для оборудования
с сверхвысоким давлением таким как Agilent 1200™ или Waters Acquity UPLC™
Однако, как старый и хорошо зарекомендовавший себя разработчик и
поставщик колонок и сорбентов,
компания YMC нашла недопустимым тот факт, что использование новых фаз ограничивается только специализированными
системами, и они не работают в стандартных условиях с давлением около 400 бар. По этой причине фаза Pro C18 YMC-UltraHT сохраняет мощные свойства быстрой, ультраэффективной фазы
в обычном хроматографическом режиме. Поскольку фаза Pro C18 YMC-UltraHT требует значительно меньшего давления, чем другие фазы
с размером частиц 2 μm или меньше, высокие скорости потока достигаются без чрезмерного обратного давления и без необходимости использовать
специальное оборудование
Для эффективного высокопроизводительного разделения YMC предлагает ряд высокоэффективных колонок, на которых возможен
ультра быстрый анализ на обычном оборудовании. Благодаря возможности "масштабирования вниз" для большинства
стационарных фаз YMC, время, необходимое для анализа может быть уменьшено до 60 сек и менее, в зависимости от хроматографических условий.
Колонки LC YMC-UltraHT обеспечивают значительную экономию времени
без необходимости использовать высокое давление
ЖХ
Колонки YMC-UltraHT обеспечивают очень высокие скорости разделений даже
на обычным ВЭЖХ оборудовании.
Входит в семейство ProFamily, основа ультрачистый силикагель, обеспечивает прекрасное разрешение для широкого круга аналитов.
Полная масштабируемость и "вверх" и "вниз"
YMC-UltraHT Pro C18
YMC-Pack Pro C18
Размер частиц, μm
2
3, 5
Размер пор, nm
12
12
Площадь поверхности, m2g-1
330
330
Содержание углерода, %
17
Интервал pH
2,0 - 8,0
2,0 - 7,5
С момента появления семейства стационарных фаз ProFamily фаза YMC-Pack Pro C18 продемонстрировала свою уникальные возможности
для широкого круга ВЭЖХ задач в фармацевтическом и биотехнологическом и производствах где эффективность и надежность - главное требование.
Все эти качества в полной мере передались новой фазе для быстрого разделения YMC-UltraHT Pro C18.
Еще на заре ВЭЖХ существовали аналитические проблемы, требующие увеличения эффективности разделений - сложные аналиты и необходимость
сократить время анализа, чтобы справиться с растущим числом образцов. Кроме уменьшения размеров колонки и увеличения скорости
потока, уменьшение размера частиц сорбента - мощный инструмент для увеличения эффективности.
Известное уравнение Ван-Деемтера определяет "Высоту, Эквивалентную Теоретической тарелке" как функцию линейной скорости u:
H = A + B/u + Cu.
Здесь А, В, С константы описывающие вклад
А - вклад неоднородности потока подвижной фазы;
В/u - вклад слагаемых диффузного характера;
Сu - вклад кинетики массообмена.
Кривые Ван-Деемтера демонстрируют уменьшение H когда используется сорбент с меньшим размером частиц, чем YMC-Pack Pro C18,
при одновременном сдвиге минимальной скорости в большую сторону
Кривые Ван-Деемтера
Результаты исследования зависимости числа теоретических тарелок от размера
частиц
Уменьшение размера частиц от 5 μm и 3 μm до 2 μm позволяет
уменьшить длину колонки почти в три раза без уменьшения эффективности.
Это обеспечивает уменьшение времени разделения и снижение количества
элюента.
Длина Колонки, мм
Число теоретических тарелок
Размер частиц
5 μm
3 μm
2 μm
150
80 000
120 000
240 000
100
67 000
80 000
160 000
50
33 000
40 000
80 000
Разработка метода
YMC-Pack Pro C18 это колонка на силикагелевой основе, которая, как
показано на диаграмме ниже, имеет
среднюю гидрофобность и способность образовывать водородные связи. Поэтому YMC-Pack Pro
C18 подходит для разработки методов практически в любой области, включая
фармацевтические продукты, сельскохозяйственную химию, пищевые и натуральные
продукты.
Диаграмма селективности
Благодаря технологии, используемой при производстве YMC-Pack Pro C18, методы
легко масштабируются "вниз" без изменения селективности. как демонстрируется ниже
Как показано на приведенных ниже примерах, обычные задачи ВЭЖХ легко решаются методом быстрой хроматографии
Ultra Fast LC с помощью колонок YMC-UltraHT Pro C18. При этом:
Повышается эффективность (90%)
Значительно сокращается время анализа (90%).
Уменьшается расход растворителя (93%).
Стандартная ЖХ
Быстрая хроматография (Ultra Fast LC Method)
Myricetin
Querecetin
Apigenin
Kaempferol
Baicalein
Chrysin
Acacetin
Элюент:
Ацетонитрил / Вода /Муравьиная кислота (35/65/0.1)
Скорость потока:
1.0 ml/min (1.00 mm/sec)
Температура:
40 °C
Детектор:
UV at 220 nm
Стандартная ЖХ
Быстрая хроматография (Ultra Fast LC Method)
Scopolamine
Atropine
Cinchonine
Quinine
Dihydroquinine
Элюент:
20 mM CH3COOH-CH3COONH4 (pH 4.9) /
Ацетонитрил (80/20)
Скорость потока:
1.0 ml/min (1.00 mm/sec)
Температура:
40 °C
Детектор:
UV at 220 nm
Применение ВЭЖХ к биологическим разделениям - важнейшая и быстро развивающаяся область.
YMC-UltraHT Pro C18 имеет выдающиеся хроматографические свойства, которые позволяют использовать ее в решении
сложной проблемы пептидного кадрирования, когда многочисленные пептиды образуются при ферментативном переваривании.
Пептидное Картирование
Элюент:
A) Ацетонитрил / Вода / TFA (10/90/0.1)
B) Ацетонитрил / Вода / TFA (35/65/0.1)
Скорость потока:
0.2 ml/min
Температура:
37 °C
Детектор:
UV at 220 nm
Образец:
Tryptic digest of Cytochrome c (5 mg/ml; 37 °C; 24h)
Возможности сорбента
Для быстрой хроматографии, использующей частицы уменьшенного размера, очень
важно найти
оптимальное соотношение между размером частиц и высоким обратным давлением.
Используемая YMC технология позволяет производить силикагель
сферической формы с очень узким разбросом по размеру, что приводит к понижению обратного давления.
Колонки YMC UltraHT Pro C18 на основе этого силикагеля демонстрируют выдающуюся эффективность для быстрой
жидкостной хроматографии без экстремально высокого давления, которое
необходимо для работы с фазами других производителей с размером частиц 2 μm и менее.
Поэтому для работы с C18 YMC UltraHT
нет необходимости использовании специальных систем .
Давление в колонках
Колонки:
50 x 2.0 или 2.1 мм i.d.
Элюент:
Ацетонотриле / Вода (60/40)
Температура:
25 °C
Образец
Бутилбензоат
Появление YMC-Pack Pro C18 2 μm позволяет легко масштабировать методы, разработанные для YMC-Pack Pro C18 3 μm and 5 μm.
Воспроизводимость
Uracil
Methyl benzoate
Naphthalene
Butyl benzoate
Колонка:
50 x 2.0 mm i.d.
Элюент:
Ацетонитрил / Вода (60/40)
Температура:
25 °C
Детектор:
UV at 270 nm
На графике ниже приведена зависимость высоты, эквивалентной теоретической тарелке (HETP) от линейной скорости при использовании
различных органических растворителей. Оптимальная HETP при использовании метанола достигается в интервале скоростей, отличном
от оптимального диапазона ацетонитрила из-за различных вязкостей растворителей. Поэтому оптимальный
диапазон скорости потока зависит от растворителя.
Максимальное разрешение и оптимальное обратное давление достигается подбором расхода, температуры и
органического растворителя.
Зависимость скорости от
высоты, эквивалентной теоретической тарелке (HETP)
Колонка:
YMC-UltraHT Pro C18, 2 μm, 50 x 2.0 mm i.d.
Температура:
25 °C
Образец:
Бутилбензоат
Патентованные технологии энд кэппинга и химической прививки обеспечивают выдающуюся эффективность вместе с отличной формой пика
Форма Пика
Быстрая жидкостная хроматография
Кроме уникальной по своим характеристикам YMC-UltraHT
быстрые хроматографические разделения
могут успешно выполняться на колонках YMC 3 μm. Эти колонки сохраняют улучшенную
селективность,
максимальное разрешение и прекрасную форму, характерные для колонок YMC, что позволяет
хроматографистам решать задачи быстрого определения состава образцов. YMC Fast LC колонки выпускаются
длиной 10, 20 или 33 мм и 2.1, 3.0, и 4.0 ID. Примеры быстрых
разделений на таких колонках приведены ниже.
Сильно полярные соединения, антибиотики, катехоламины,
нуклеиновые кислоты, водорастворимые витамины, кислотные, нейтральные, основные и хелатные соединения
A) Вода / Муравьиная кислота (100/0.1)
B) Ацетонитрил / Муравьиная кислота (100/0.1)
Градиент:
0-50% B (0-4 мин)
Скорость потока:
3.0 ml/min
Температура:
30 °C
Детектор:
UV at 270 nm
Давление
155 бар (2300 psi; 15.5 MPa)
Субминутная жидкостная хроматография
При стандартных ВЭЖХ условиях (C18, 3.5 μm, 50 x 4.6 mm, 1.5 ml/min, H2O (0.05% муравьиная кислота)/ацетонитрил градиент) для
разделения образца, содержащего диазепам, дибензил L-тартрат и 4-хлор-2-бензоиланилин требуется 4,5 минуты
Conventional LC Method
Колонка:
Zorbax XDB-C18 50 x 4.6 mm i.d.
Элюент:
Ацетонитрил / Вода (0.05% муравьиная кислота) (10-95%)
Температура:
25 °C
Скорость потока:
1.5 ml/min
Однако, если использовать высокоэффективные колонки
YMC-Pack Pro C18 Fast LC и стандартное аналитическое оборудование можно значительно
сократить время анализа.
Ниже показано, как использование передовой хроматографической колонки может уменьшить время анализа, понизить расход растворителя не ухудшая
при этом форму пика или разрешение.
Очень важно, что YMC-Pack Pro C18 Fast LC создают намного более низкое обратное давление чем колонки других производителей и которое значительно
меньше давления, получающегося при использовании ULTRA FAST LC колонок. При этом
YMC-Pack Pro C18 Fast LC обеспечивает качество разделения соответствующее
колонкам с размером частиц менее 2 μm.
Fast LC Method
Колонка:
YMC-Pack Pro C18, 3 μm, 50 x 4.0 mm i.d.
Элюент:
Ацетонитрил / Вода (0.05% муравьиная кислота) (10-95%)
Температура:
80 °C
Скорость потока:
4.0 ml/min
Следующие примеры демонстрируют такие преимущества использования передовых хроматографических колонк YMC как:
Увеличивает скорость анализов
Дает значительную экономию времени
Обеспечивает необходимое разрешение при работе на обычном ВЭЖХ оборудовании, не
прибегая к
без необходимости использовать системы сверхвысокого давления
Ароматические кетоны
Theophylline
2-Acetylfuran
Acetanilide
Acetophenone
Propiophenone
Butyrophenone
Benzophenone
Valerophenone
Hexanophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Колонка:
YMC-Pack Pro C18 (3 μm, 12 nm) 20 x 4.6 mm i.d.
Элюент:
A) Вода / Муравьиная кислота (100/0.1)
B) Ацетонитрил / Муравьиная кислота (100/0.1)
A) Вода / Муравьиная кислота (100/0.1)
B) Ацетонитрил / Муравьиная кислота (100/0.1)
Градиент:
0-100% B (0-4 мин)
Скорость потока:
3.0 ml/min
Температура:
30 °C
Детектор:
UV at 254 nm
Проба:
10 μl
Давление
100 бар (1490 psi; 10 MPa)
Стероиды
Prednisolone
Cortisone
Corticosterone
Estradiol
Estrone
Progesterone
Колонка:
YMC-Pack Pro C18 (3 μm, 12 nm) 20 x 4.6 mm i.d.
Элюент:
A) Вода
B) Ацетонитрил
Градиент:
20-64% B (0-4 мин)
Скорость потока:
3.0 ml/min
Температура:
30 °C
Детектор:
UV at 220 nm
Проба:
10 μl
Давление
94 бар (1400 psi; 9.4 MPa)
Колонка:
YMC-Pack Pro C18 (3 μm, 12 nm) 20 x 4.6 mm i.d.
Элюент:
A) Вода
B) Ацетонитрил
Градиент:
20-64% B (0-4 мин)
Скорость потока:
3.0 ml/min
Температура:
30 °C
Детектор:
UV at 220 nm
Проба:
5 μl
Давление
107 бар (1600 psi; 10.7 MPa)
Тесты на
Полиядерные Ароматические Углеводороды (PAH) - одна наиболее часто выполняемых проверок при экологическом мониторинге.
Использование колонок YMC PAH позволяет выполнить разделение 16 PAH, перечисленных в EPA (Управление по охране окружающей среды)
менее чем за 4 минуты на стандартном оборудовании. Для сравнения: подобное разделение на специализированной системе
Waters проводится за 7 минут.
16 PAH в соответствии EPA 610
Колонка:
YMC PAH 3 μm, 50 x 4.0 mm i.d.
Элюент:
A) MeOH / Водв (80/20)
B) Ацетонитрил
Скорость потока:
2.0 ml/min
Температура:
24 °C
Детектор:
UV at 254 nm
Результаты для этого же разделения 16 PAH, полученные на YMC, выглядят предпочтительнее, чем опубликованные результаты Waters, поскольку
анализ
на колонке YMC занимает 4 минуты по сравнению с 7 у Waters и не требует никакого специального оборудования, кроме стандартной ВЭЖХ системы.
Стандартный ЖХ метод (M. Swartz (Waters Corp.), C.
Weiß (Waters GmbH), GIT Labor-Fachzeitschrift 3 (2005) 243)
Колонка:
C18 Acquity, 1.7 μm, 100 x 2.1 mm i.d.
Элюент:
Ацетонитрил / Вода (100/0.1)
Скорость потока:
0.4 ml/min
Информация для заказа.
YMC-UltraHT Pro C18 (Кат №: AS12S020502WT)
Частицы:
Сферические частицы ультра-чистого силикагеля, 2 μm диаметр, 12 nm размер пор
Колонки для сверхбыстрой хроматографии Ultra Fast LC
